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732阳离子交换树脂对屎肠球菌谷氨酸脱羧酶活性的促进作用
来源:食品科学网 阅读量: 114 发表时间: 2019-09-26
作者: 杨胜远,韦锦,曾婵,彭罗慧
关键词: 屎肠球菌|谷氨酸脱羧酶|732阳离子交换树脂|γ-氨基丁酸|转化活性
摘要:

通过对732阳离子交换树脂对屎肠球菌谷氨酸脱羧酶(glutamate decarboxylase,GAD,EC4.1.1.15)活性的影响进行探讨,构建了732阳离子交换树脂-细胞GAD复合转化体系。结果表明:经含0.2?mol/L?L-谷氨酸(L-glutamic acid,L-Glu)的0.2?mol/L乙酸-乙酸钠缓冲液(pH?4.2)平衡的732阳离子交换树脂可显著提高屎肠球菌细胞GAD的转化活性,γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)产量较对照组增加了32.30%;L-Glu/谷氨酸一钠(monosodium glutamate,MSG)(2∶1)固体混合物能有效调节反应体系的pH值和维持反应液的底物浓度,显著增加GABA产量,当添加量为30?g/L时,GABA产量较不添加L-Glu/MSG(2∶1)固体混合物的对照组提高了52.40%;732阳离子交换树脂与L-Glu/MSG(2∶1)固体混合物对细胞GAD的转化活性具有协同促进作用,适宜的732阳离子交换树脂-细胞GAD复合转化体系组成为732阳离子交换树脂10?g、0.3?mol/L?MSG溶液(溶于0.2?mol/L乙酸-乙酸钠缓冲液,pH?4.2)10?mL、100?mg/mL屎肠球菌细胞悬液10?mL和L-Glu/MSG(2∶1)混合物30?g/L。在该反应体系下,80?r/min、40?℃水浴振荡器反应24?h,GABA产量为(4.57±0.11)mmol,较对照组GABA产量((2.29±0.08)mmol)提高了99.56%。

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