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利用易错PCR构建酱油酿造用T酵母spt15突变库
来源:食品科学网 阅读量: 140 发表时间: 2019-09-26
作者: 赵秀丽,张毓秀,孙月芹,侯丽华
关键词: 易错PCR|spt15|基因突变库|筛菌|酱油发酵
摘要:

为得到酱油酿造优良性状的微生物,对酱油酿造用T酵母进行研究。首先利用易错聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术构建spt15(可编码TATA结合蛋白)的突变基因库,然后重组于表达载体YEplac195中,并导入尿嘧啶营养缺陷型菌株W303和WM2中筛选。结果表明:在不同盐质量分数的固体培养基中经筛选获得4?个最佳突变菌株,其具有耐盐优势,在酱油发酵中可产生较高的氨基酸态氮。经PCR产物测序可知,重组质粒中目的基因的序列有碱基的增添、缺失和替换。

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