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—— 中国食品杂志社
目的：研究黑线鳕鱼（Melanogrammus aeglefinus）皮胶原蛋白胰蛋白酶酶解多肽的抗氧化、抑制光损伤作用，提高鱼皮的再利用价值。方法：利用单因素试验和响应面试验设计，探讨黑线鳕鱼皮胶原蛋白的最佳酶解工艺。将制得的酶解多肽通过基质辅助激光解离飞行时间串联质谱仪（matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight tandem mass spectrometry，MALDI-TOF MS/MS）测定多肽序列。利用Discovery Studio中CDOCKER模块将所得的优势肽与抗氧化相关的Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1（Keap1）进行分子对接。用不同质量浓度的多肽预处理人表皮角质形成细胞（HaCaT）后，使用中波紫外线诱导HaCaT细胞构建光损伤模型，通过超氧化歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）活性、丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量及细胞凋亡与周期来研究酶解多肽抑制光损伤的能力。结果：黑线鳕鱼皮胶原蛋白在胰蛋白酶质量分数1.23%、酶解温度52.95?℃、酶解时间1.75?h条件下，水解度为78.33%。MALDI-TOF MS/MS测定出酶解液中的优势肽序列为V-IFFVTMGTP-R、L-SIVPV-R和L-MHT-T。通过分子对接发现V-IFFVTMGTP-R与Keap1结合最稳定，从而预测其具有抗氧化的作用。用250?mg/mL酶解液处理光损伤的HaCaT细胞，其SOD、GSH-Px活性较模型组极显著提高（P＜0.01），MDA含量极显著降低（P＜0.01）。结论：黑线鳕鱼皮胶原蛋白胰蛋白酶酶解多肽具有抗氧化活性，对光损伤具有一定的抑制作用。
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