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微滴数字PCR技术在多拷贝木聚糖酶酿酒酵母工程菌筛选中的应用
来源:食品科学网 阅读量: 106 发表时间: 2019-09-26
作者: 兰雪,张斯童,李哲,常浩,孙旸,王刚,陈欢,王春凤,陈光
关键词: 微滴数字聚合酶链式反应技术|多拷贝|酿酒酵母|木聚糖酶|rDNA整合法
摘要:

为获得高产木聚糖酶酿酒酵母工程菌,利用rDNA整合法构建木聚糖酶酿酒酵母整合表达载体,实现木聚糖酶基因的多拷贝表达,并利用微滴数字聚合酶链式反应技术对转化子拷贝数进行检测,分析木聚糖酶基因拷贝数与酶活力之间的关系。结果表明:利用rDNA整合法获得了10?株不同拷贝数木聚糖酶酿酒酵母工程菌,对其酶活力进行测定,发现当拷贝数小于9时,菌株产酶能力随拷贝数增加而增强,9?拷贝数时菌株产酶能力最强,酶活力为308?U/mL,超过9?拷贝,产酶能力降低。

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