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基于ATP再生体系快速检测乳品中微生物
来源:食品科学网 阅读量: 128 发表时间: 2019-09-26
作者: 常超,王凌,伍金娥,
关键词: ATP再生|生物发光|快速检测|乳品
摘要:

基于焦磷酸(pyrophosphoric acid,PPi)再生三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)建立乳品中微生物快速检测方法。通过单因素试验优化PPi再生ATP反应条件,并考察方法的灵敏度、准确度、精密度和稳定性。结果表明,PPi再生ATP最佳反应条件为腺苷酰硫酸(adenosine phosphosulfate,APS)浓度10 μmol/L,ATP硫酸化酶(ATP sulfurylase,ATPS)活力0.15 U/mL、反应pH7.8。在最佳的ATP再生条件下偶联生物发光法,对ATP标准品、大肠杆菌、铜绿假单胞菌的检测限分别为10-17mol/mL、102CFU/mL和102CFU/mL。工作曲线在102~107CFU/mL范围内线性关系良好,对乳品基质的回收率为81.33%~97.78%,变异系数为14.24%~22.17%,与国标平板计数法对比显示两种方法检测结果相关性良好,相关系数为0.96。本方法快速、简单、灵敏、稳定,适用于乳品中微生物快速监测。

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