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AccQ-Tag柱前衍生反相高效液相色谱法测定谷物及食糜中氨基酸含量
来源:食品科学网 阅读量: 108 发表时间: 2019-09-26
作者: 韩粉丽,韩 飞,李爱科,陈曦,宋歌,范柳萍,余治权
关键词: 反相高效液相色谱法|AccQ-Tag柱前衍生|谷物|食糜|氨基酸
摘要:

用AccQ-Tag法测定不同谷物及食糜中氨基酸的含量,并优化原料与酸解剂的比例。采用内标法定量,6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯为柱前衍生剂,用反相高效液相色谱仪,2475荧光检测器(激发波长250nm、发射波长395nm),Waters AccQ-Tag Nova-PakTMC18柱(3.9mm×150mm,4μm),柱温37℃,以醋酸钠(pH4.95)缓冲液为流动相A,纯乙腈为流动相B,水为流动相C进行梯度洗脱,进样量为10μL。结果发现,5mg原料的最优酸解剂为500μL;17种氨基酸线性回归方程在25~500μmol/L范围内线性良好(胱氨酸(Cys)浓度在12.5~250μmol/L之间),相关系数r为0.9996~0.9999,测定的平均回收率为97.56%~103.92%(n=3),相对标准偏差为0.31%~2.75%(n=3)。本法快速简便,能够适用于谷物及食糜中氨基酸含量的测定。

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