本实验利用小鼠3T3-L1前脂肪细胞对绿茶多糖(green tea polysaccharides,GTP)、红茶多糖(black tea polysaccharides,BTP)和乌龙茶多糖(oolong tea polysaccharides,OTP)的减肥作用进行评价。使用气相色谱对GTP、BTP、OTP的单糖组成进行分析。采用噻唑蓝染色法测定3 种茶多糖(tea polysaccharides,TPs)对3T3-L1前脂肪细胞增殖活力的影响。使用流式细胞仪检测3 种TPs对3T3-L1前脂肪细胞细胞周期的影响。采用传统“鸡尾酒”法诱导3T3-L1细胞分化成脂后,测吸光度并计算其分化率。采用甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶(glycerol phosphate oxidase-peroxidase,GPO-PAP)法测定细胞中甘油三酯(triglyceride,TG)含量的变化。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)技术测定与脂质代谢相关基因的表达量。结果显示3 种TPs均能显著抑制3T3-L1前脂肪细胞的增殖与分化(P<0.05)。添加100 μg/mL的TPs能使细胞分化率显著下降至(62.00±6.61)%(GTP)、(82.95±4.25)%(BTP)、(97.24±5.80)%(OTP)。另外,在细胞培养至第5天检测表明,这3 种TPs显著促进G0/G1期细胞数量的累积,细胞比例分别为(68.52±2.28)%(GTP)、(67.11±1.68)%(BTP)、(59.69±1.35)%(OTP)。RT-PCR分析结果显示TPs可以调控相关脂肪细胞因子的表达。在本研究中,在3T3-L1前脂肪细胞中GTP的减肥作用强于BTP和OTP。TPs的加入上调脂联素的表达从而激活腺苷酸活化蛋白激酶信号通路调控相关脂肪细胞因子的表达,并最终抑制TG的合成与3T3-L1前脂肪细胞的分化。
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