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—— 中国食品杂志社
以错配反应与正常反应之间的ΔCt值为指示，研究不同碱基错配类型、位置与个数条件下引物3´端与模板 之间非特异性扩增的发生规律，并构建ΔCt值的二次多项式回归模型。结果表明，碱基错配种类、位置、个数对实 时荧光定量聚合酶链式反应（quantitative real-time polymerase chain reaction，RT-qPCR）的非特异性扩增都有显著 影响，并呈现出较强的规律性。碱基类型上，研究的各个位置上异型错配较易发生非特异性扩增，而同型错配则 较难发生，并且两种错配类型之间有显著性差异（P＜0.05）；错配位置上，相同条件下引物3’端第1位碱基错配对 ΔCt值影响最大，错配位置远离3’端时对ΔCt值的影响逐渐减小，非特异性扩增也更容易发生；错配个数上，随着 错配碱基个数的增加对ΔCt值得影响程度不断增大，非特异性扩增较难发生。构建ΔCt值预测模型R2达到0.837 1， 根据此模型可以预测出不同位置、不同错配类型条件下ΔCt值，从而可以判断RT-qPCR非特异性扩增的发生的难易 程度。
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