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抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇纳米抗体随机突变与筛选
来源:食品科学网 阅读量: 115 发表时间: 2017-06-15
作者: 吴红静,曹冬梅,许 杨,付金衡,涂 追
关键词: 纳米抗体;脱氧雪腐镰刀菌烯醇;易错聚合酶链式反应;噬菌体展示
摘要:

采用易错聚合酶链式反应技术,对来源于天然纳米抗体文库的抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol, DON)纳米抗体进行随机突变,通过优化和比较突变条件,构建了突变分布均匀的突变文库。噬菌体展示技术对 突变文库进行了6 轮筛选,获得了8 种突变序列,其检测信号为野生型2.1 倍。多序列比对及三维结构建模分析表 明,突变序列的突变位点集中于互补决定区与框架区连接的区域,并且部分序列出现了可以形成二硫键的氨基酸残 基。研究结果为抗DON纳米抗体进一步的深度突变和改造提供了线索,同时可为其他抗小分子纳米抗体的改造提 供借鉴。

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