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黑曲霉N5-5单宁酶的纯化及酶学性质测定
来源:食品科学网 阅读量: 154 发表时间: 2017-06-07
作者: 张 帅,曹 庸,梁晓莹,林婉如
关键词: 单宁酶|黑曲霉|纯化|纯酶|性质测定
摘要:

采用中空纤维膜超滤和葡聚糖凝胶层析相结合的方法对黑曲霉N5-5单宁酶进行纯化,然后对纯酶性质进行测定。结果显示,黑曲霉N5-5单宁酶用该方法纯化后,可纯化近20 倍,酶活力可回收23.30%。对纯酶作十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,可知黑曲霉N5-5单宁酶为分子质量64.2 kD的单肽链蛋白。纯酶的酶促反应最适温度为45 ℃,且在25~45 ℃范围内热稳定性良好;酶促反应最适pH值为5.0,且在pH 5.0~5.5范围内酸碱稳定性良好。另外,反应动力学测定结果表明,该酶对底物没食子酸丙酯的米氏常数Km为0.916 mmol/L,最大反应速率vmax为0.877 mmol/(L?min)。

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