以菠萝蜜果肉过氧化物酶(peroxidase,POD)为研究对象,用丁二酮、碳化二亚胺(N-ethyl-N’-3-dimethylaminopropyl carbodiimide,EDC)、N-乙酰咪唑(N-acetylimidazole,NAI)、β-巯基乙醇(β-mercaptoethanol,MT)、对-氯汞苯甲酸(parachloro-mercuri-benzoate,pCMB)和焦碳酸二乙酯(diethylpyrocarbonate,DEPC)对POD进行化学修饰,研究酶活性必需基团。结果表明,丁二酮、EDC和NAI对酶活力无显著影响,说明精氨酸、羧基和酪氨酸与酶活力无关;pCMB、DEPC和β-巯基乙醇强烈抑制酶活性,说明半胱氨酸和组氨酸是酶活性的必需基团,二硫键对酶活性有重要贡献。动力学分析和底物保护实验表明,DEPC为POD的竞争性抑制剂,组氨酸位于酶活中心。
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