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—— 中国食品杂志社
建立牛乳中蜡样芽孢杆菌便捷可靠的检测方法，根据已公布的蜡样芽孢杆菌hblA基因序列设计内外引物，并向反应体系中加入荧光染料SYBRGreen Ⅰ，利用实时荧光监测仪，建立实时荧光环介导等温扩增技术（real-timefluorescence loop-mediated isothermal amplification，RealAmp）检测蜡样芽孢杆菌的方法，扩增产物经电泳和酶切鉴定。通过21 株致病菌验证RealAmp特异性，并比较了RealAmp与普通环介导等温扩增技术的敏感性，对人工污染的检出限进行了测定。结果表明对21 株致病菌进行特异性实验，4 株蜡样芽胞杆菌呈阳性结果，17 株非蜡样芽胞杆菌均呈阴性结果。RealAmp检测纯菌的灵敏度为8.2 CFU/mL，比普通环介导等温扩增技术的灵敏度高10 倍，人工污染牛乳RealAmp的检出限为8.2 CFU/mL。并且在20 min左右即可判定结果。该方法快速、准确、灵敏度高、操作便捷、可实时监控检测蜡样芽孢杆菌，有望成为快速检测蜡样芽孢杆菌的有效方法。
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