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—— 中国食品杂志社
本实验首先从花生中提取总RNA，利用反转录聚合酶链式反应技术克隆了花生过敏原蛋白Ara h 6全cDNA，并以此为模板扩增出Ara h 6目的基因。将目的基因与pMD19-T Simple质粒进行重组后转入BL21（DE3）宿主表达菌中，异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷诱导产物表达，并利用镍离子亲和层析纯化表达产物。DNA测序结果显示Ara h 6基因片段全长为438 bp，编码145 个氨基酸，与已知该蛋白DNA序列97%相同；十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示表达产物分子质量为24 kD，与融合组氨酸标签的重组Ara h 6蛋白理论分子质量相符；质谱鉴定结果表明重组蛋白的一级结构与天然Ara h 6匹配度为100%；Western blotting结果显示融合蛋白能够为抗Ara h 6多克隆抗体所识别，具有免疫原性。
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