以轮台小白杏(甜杏仁品种)和甲麦黄杏(苦杏仁品种)为实验材料,采用同源基因克隆方法克隆野黑樱苷水解酶(prunasin hydrolase,PH)基因。轮台小白杏PH基因命名为PaLTPh(GenBank登录号:KF888615),序列长度3 686 bp;甲麦黄杏PH基因命名为PaMJPh(KF888616),序列长度3 690 bp。PaLTPh和PaMJPh与扁桃Ph691基因相似性为94%。根据PaLTPh和PaMJPh保守区序列设计引物,克隆编码区(coding sequence,CDS)序列。PaLTPh CDS(KF888617)和PaMJPh CDS(KF888618)序列长度均为1 635 bp,与扁桃Ph691全CDS区相似性为97%。PaLTPh CDS和PaMJPh CDS序列均为全长的开放阅读框,编码蛋白质长度为544 个氨基酸。PaLTPH蛋白和PaMJPH蛋白均包含长度为26 个氨基酸的信号肽和糖基水解酶家族Ⅰ结构域,可催化野黑樱苷水解为扁桃腈和葡萄糖。杏PH基因与扁桃Ph691具有高度的同源性。
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