用碱性蛋白酶水解食源性明胶以制备抗冻多肽,通过控制酶解条件获得具有抗冻活性的明胶多肽酶解液,并对其进行色谱分离、质谱鉴定及氨基酸全序列测定。结果表明:当酶与底物比1:15、酶解时间30min、酶解温度45℃时,所获得的明胶多肽酶解液的抗冻活性最高;酶解制备的明胶多肽液经过冷-热循环(cold-heat-stage)后抑制冰晶生长和抗冻活性表现出特定的规律,说明酶解条件的控制优化是实现明胶多肽液抗冻活性的关键。通过Sephadex G-50、SP Sephadex C-25、C18-RPLC色谱分离和MALDI-TOF质谱鉴定,确定分子质量为2107D的特异性多肽表现出显著的抗冻活性。通过Edman降解法测得其氨基酸全序列为GERGFPGERGSPGAQGLQGPR。
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