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Monellin-EGFP融合蛋白在毕赤酵母中的表达
来源:食品科学网 阅读量: 107 发表时间: 2017-06-07
作者: 金筱耘,赵爱春,李 军,李镇刚,王茜龄,吴存容,余茂德*
关键词: Monellin甜蛋白|绿色荧光蛋白|真核表达|桑树
摘要:

根据已报道的Monellin甜蛋白氨基酸序列,结合毕赤酵母与桑树密码子的偏好性,人工设计合成单链monellin基因,并与增强型绿色荧光蛋白EGFP基因连接,构建融合表达载体。采用电击转化法成功将表达载体导入毕赤酵母GS115中,并获得高效表达的重组子pPIC9K-M-E。经PCR检测,SDS-PAGE和Western Blot杂交证实已表达出融合蛋白,该蛋白经纯化与盲测实验,结果显示其甜度约为标准蔗糖的500倍。

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