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热稳定酸性β-葡萄糖苷酶的分离纯化及其酶学性质
来源:食品科学网 阅读量: 93 发表时间: 2017-06-07
作者: 陈今朝,王剑锋,*,王慧超,谭永忠
关键词: 胞内酶|乙醇沉淀|对硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷|京尼平苷|β-葡萄糖苷酶
摘要:

耐酸性黑曲霉菌株Aspergillus niger L.的菌丝体破碎液依次经过乙醇沉淀、离子交换层析和凝胶过滤等步骤处理,获得电泳纯的β-葡萄糖苷酶,SDS-PAGE显示其分子质量为125.7kD。β-葡萄糖苷酶水解对硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷的最适pH值为3.0~4.0,最适温度为70℃,表观米氏常数(Km)值为2.35mmol/L,表观kcat/Km值为2.99×104L/(mol·s);水解京尼平苷、水杨苷的表观kcat/Km值分别是1.26×104、1.37×104L/(mol·s);水解活性受Mn2+的显著激活和Fe2+、Zn2+、Cu2+等离子的微弱抑制。该酶活性在pH2.0~8.3保持稳定;酶在65℃时保温60min,残余酶活达到了85%,是一种热稳定酸性β-葡萄糖苷酶。

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