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Thermococcus siculi HJ21 α-淀粉酶186Asp定点突变对酶活性的影响
来源：食品科学网 阅读量: 84 发表时间: 2017-06-07
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作者: 吕明生，杨 帆，胡建恩，房耀维，焦豫良，王淑军,*，刘 姝
关键词: α-淀粉酶|定点突变|TSA基因|186位点|酶活性
摘要:

为确定超嗜热古菌Thermococcus siculi HJ21α-淀粉酶(TSA)中特定氨基酸及所在位点与酶活性间的关系，以含TSA基因的pEt-28a-His6质粒为模板，利用定点突变技术，将第186位点的天冬氨酸(Asp)突变为天冬酰胺(Asn)，突变子转化至E. coli BL21(DE3)并经IPTG诱导表达，测定突变前后的酶活性，定点突变后的TSA无酶活性；采用DNAStar和Deepview蛋白分析软件，预测突变前后TSA蛋白的二级结构和三级结构，结果表明Thermococcus siculi HJ21α-淀粉酶的186位点对维持TSA的酶活性具有重要意义，它的突变导致酶蛋白二级结构组件及氢键网络的改变。

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