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—— 中国食品杂志社
分别以R. miehei 3.4960基因组和总RNA为模板，通过PCR和RT-PCR扩增得到脂肪酶全长基因和脂肪酶cDNA碱基序列，两碱基序列测序结果比对表明：脂肪酶DNA碱基序列由5个内含子和6个外显子组成，5个内含子大小分别为75、58、64、73、59bp，位于DNA序列(以起始密码子ATG的碱基A为1)的600～674位、929～986位、1076～1139位、1227～1299位、1382～1440位碱基处。脂肪酶RML mRNA碱基序列与已公布的R. miehei脂肪酶基因mRNA(EMBL Nucleotide Sequence Database Accession No. A02536)碱基序列有5个碱基的差异，其编码的氨基酸序列有1个发生了改变。利用酿酒酵母表达质粒pICAS1，实现了脂肪酶RML基因在酿酒酵母中的高效分泌表达，并对重组脂肪酶RML进行了相关酶学性质分析。酶学性质研究表明：重组酶的最适反应温度为45℃，最适pH值为8.6；该酶偏爱中链长的酯(C8～C12)，对12个碳的酯具有最佳活性，对C16长链酯也有较高的活性，对短链酯的活性较弱；金属离子Cu2+、Fe2+对酶活性有显著抑制作用，Ca2+和Mg2+对酶活有部激活作用。
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