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乳源性免疫活性肽在E.coli BL21中分泌表达的诱导条件优化
来源:食品科学网 阅读量: 122 发表时间: 2017-06-07
作者: 胡 迪,张少辉*
关键词: 乳源性免疫活性肽|pTYB11|原核表达|IPTG|诱导条件优化
摘要:

设计4个乳源性免疫活性肽的目的基因后,利用基因重组技术成功构建原核表达载体pTYB11,并将重组质粒转化到E.coli BL21中,通过改变异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷 (IPTG)的浓度、培养时间和培养温度,设计正交试验来优化乳源活性小肽的IPTG诱导表达条件,使目的蛋白可在E.coli BL21中高效表达。依据15% SDS-PAGE电泳分析得到融合蛋白的表达量,选出最适诱导条件为IPTG终浓度0.1~0.2mmol/L,在12~15℃条件下培养20h,得到大小为59.2kD左右的融合目的蛋白,其表达量可占总蛋白表达量的40%,经Western Blotting鉴定正确。

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