采用研磨法破碎黑曲霉H1-9b 菌丝体,经pH5.7 磷酸缓冲液抽提获得粗酶液,粗酶液经DEAE-Sepharose离子交换层析和Superdex-200 凝胶过滤层析,得到葡萄糖氧化酶纯品。该酶的比活力为30569.7U/mg,回收率为30.2%,提纯倍数为41.4 倍,分子质量为94.1kD,为单亚基酶。该酶最适温度为37℃,最适pH 值为5.7,在30~40℃温度范围内稳定性较好,在pH4.0~8.0 范围内活性稳定。以不同浓度葡萄糖为底物在最适条件下测得该酶Km 值为30.69mmol/L,Vmax 为21.88μmol/L。Ag+、Cu2+、Zn2+ 对该酶活性有较大抑制作用。结果表明,该酶稳定性较好,有一定的应用价值。
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