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—— 中国食品杂志社
开发一种结合两步双水相萃取和亲和吸附分离的新型集成化方法，用于从辣根中分离和纯化辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）。首先，将两步双水相萃取工艺用于糖和色素的分离，然后将“多价”苯硼酸亲和磁性石墨烯复合材料（d-PBA-GO@Fe3O4@PEI）用作进一步吸附分离，实现从杂质蛋白中选择性分离HRP。通过研究温敏聚合物17R4-盐双水相体系的液液相平衡行为，以及9 种模型化合物在双水相体系中的分配行为，最终确定8% 17R4-13.2% (NH4)2SO4双水相体系作为初步纯化的工艺体系。通过构建的集成化方法，成功地从辣根中分离出HRP，而对HRP的结构没有影响，HRP的比活力和纯化因子分别达到28.93 U/mg和1.92。该方法具有优异的分离纯化性能，对植物糖蛋白的工业化生产具有良好的前景。
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