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增强型绿色荧光蛋白在DH5α大肠杆菌中的表达
来源:食品科学网 阅读量: 97 发表时间: 2017-06-07
作者: 王晓辉
关键词: 增强型绿色荧光蛋白|pGEM-T easy|DH5α大肠杆菌
摘要:

采用PCR 技术从pEGFPpA-CAN 克隆载体中扩增出增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP),插入到pGEM-T easy载体中,构建pGT-EGFP 重组质粒,其中的SP6 启动子可用来表达EGFP 蛋白。携带pGT-EGFP 重组载体的DH5α大肠杆菌较普通DH5α大肠杆菌菌液略带淡绿色,在荧光显微镜下能够清晰观察该大肠杆菌的形态,带有绿色荧光。同时超声裂解携带pGT-EGFP 重组载体的DH5α大肠杆菌,提取菌体总蛋白,SDS-PAGE 显示EGFP 蛋白是以可溶性蛋白形式存在的,分子质量大约为30kD,与其理论值大小一致。

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