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深海古菌Thermococcus siculi HJ21高温普鲁兰酶基因的克隆及表达
来源：食品科学网 阅读量: 97 发表时间: 2017-06-07
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作者: 王淑军，吕明生，李华钟，徐金利，焦豫良，房耀维，刘 姝
关键词: Thermococcus siculi HJ21|普鲁兰酶|基因|PCR
摘要:

根据NCBI 上公布的普鲁兰酶基因的保守序列设计简并引物，以Thermococcus siculi HJ21 基因组DNA 为模板进行PCR，得到T. siculi HJ21 普鲁兰酶的基因，测序后通过Blast(NCBI)数据库比对和分析表明扩增基因有一个4056bp、编码1351 个氨基酸的开放阅读框，为一新的普鲁兰酶基因。将该基因插入表达载体pET28a，并转化Escherichia coli BL21(DE3)，经IPTG 诱导，测定普鲁兰酶比活力。重组转化子的细胞破碎液有高温普鲁兰酶活性，SDS-PAGE 电泳结果显示出分子质量约为150kD 的特异性条带。

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