采用Alcalase 2.4L FG 水解油菜蜂花粉蛋白,比较pH stat 法、OPA 法和TNBS 法测定蜂花粉蛋白水解度的差异。水解118min 后,pH stat 法、OPA 法和TNBS 法测得的水解度分别为24.7% ﹑ 13.4% ﹑ 6.6%。由于OPA试剂和甘氨酸﹑半胱氨酸﹑赖氨酸反应生成的化合物在340nm 波长处的吸光度较低,致使OPA 法测得的水解度低。TNBS 试剂和ε-NH2 的作用不稳定,也可能是由于TNBS 试剂产生的发光物使测定结果降低。在水解度较低的情况下,α-NH2 平均解离度的变化可以忽略,pH stat 法测得的水解度比较准确。
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