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孔雀石绿单克隆抗体的制备及直接竞争ELISA方法的建立
来源:食品科学网 阅读量: 100 发表时间: 2017-06-07
作者: 李晓丽,陈雪岚,刘春梅,熊勇华
关键词: 孔雀石绿|单克隆抗体|直接竞争ELISA
摘要:

通过合成羧基化孔雀石绿,采用活泼酯法制备孔雀石绿免疫抗原CMG-BSA、检测抗原CMG-OVA。采用CMG-BSA 免疫 BALB/c 小鼠,经融合、筛选和克隆化获得了一株稳定的抗孔雀石绿单克隆抗体,并建立了检测孔雀石绿的直接竞争ELISA 方法。ELISA 方法的最佳操作参数:孔雀石绿抗体稀释倍数1:16000(1mg/ml),酶标抗原(CMG-HRP)使用质量浓度0.2μg/ml。该方法具有良好的灵敏度和特异性,IC50 值0.3ng/ml,最低检测灵敏度达到0.05ng/ml,标准曲线方程为y =- 20.888x + 81.423(R2 = 0.9813)。

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