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—— 中国食品杂志社
本实验室从新疆盐湖分离得到一株产α-淀粉酶中度嗜盐菌Bacillus sp.XJ1-05，根据已报道的α-淀粉酶基因(α-AMY)序列的保守区域设计引物，从中度嗜盐菌Bacillus sp.XJ1-05基因组中扩增出α-淀粉酶基因片段，将α-淀粉酶基因纯化后克隆到pGM-T载体上测序，结果表明α-淀粉酶基因片段长约1500bp，与地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis的α-淀粉酶基因序列的同源性为95%，两种序列具有一定的同源性。按正确的阅读框架将α-淀粉酶基因片段定向克隆到表达载体pET-32a上，将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)菌株，经IPTG诱导表达，SDS-PAGE电泳表明，α-淀粉酶基因能在大肠杆菌BL21中成功表达，确定表达蛋白的相对分子量为61kD左右，与理论推导的分子量相一致；构建的大肠杆菌工程菌，所产生的α-淀粉酶是包涵体，通过超声波粉碎仪粉碎后，测α-淀粉酶酶活为原菌的1.8倍。
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