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海产品贝毒素大田软海绵酸ELISA及HPLC-MS/MS检测方法的研究
来源:食品科学网 阅读量: 126 发表时间: 2017-06-07
作者: 卢士英,柳增善,周玉,李岩松张代辉,于光,于师宇,任洪林
关键词: 大田软海绵酸|ELISA|HPLC-MS/MS|海产品
摘要:

为了检测海产品贝毒大田软海绵酸,保障其食用安全,利用活泼酯法将小分子OA与载体蛋白偶联,免疫BALB/c小鼠,细胞融合技术建立分泌抗OA的杂交瘤细胞株,并对其各种特性进行分析;小鼠腹水法大量生产抗体,纯化后建立ELISA方法,同时建立OA的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS)检测法,并对部分市售海产品进行了实际检测,ELISA方法标准曲线为y=-34.212x+83.49,相关系数为0.9784,线性范围0.4~25μg/L,灵敏度0.18μg/L;HPLC-MS/MS检测方法标准曲线y=193.07x-780.6(Q1/Q3:m/z 827.4~m/z 723.5)和y=83.021x-335.6(Q1/Q3:m/z 827.4~m/z 809.5),R2 均为0.9991,线性范围10~800μg/L,灵敏度小于2μg/L,平均RSD为4.34%。在检测的实际样品中两种样品ELISA呈阳性反应,其中一种经过了HPLC-MS/MS的验证。所建立的ELISA及HPLC-MS检测方法均可用于海产品腹泻性贝毒OA限量标准检测,为进出口海产品OA标准方法的建立提供实验基础。

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