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基于免疫亲和层析和ProteoMiner处理的母乳乳清蛋白质组学分析
来源:食品科学网 阅读量: 143 发表时间: 2021-01-08
作者: 靳登鹏,周雄,刘焕,杨娇,黄卓权,卜玲玲,柯倩华,柳春红
关键词: 母乳;多克隆抗体;免疫亲和层析;蛋白质组
摘要:

在去除母乳中高丰度蛋白的基础上,运用蛋白质组学技术分析母乳中具有重要生物学特定功能的低丰度蛋白。以1 月左右的成熟乳为实验材料,先通过免疫亲和层析和ProteoMiner低丰度蛋白富集试剂盒2 种前处理方法去除高丰度蛋白,再进行蛋白质组学分析。结果表明,2 种方法都有去除高丰度蛋白的效果,免疫亲和层析法处理后鉴定出蛋白质49 种,ProteoMiner低丰度蛋白富集试剂盒处理后鉴定出蛋白质172 种。对合计鉴定出的186 种蛋白进行生物信息学分析,Gene Ontology(GO)注释分析发现,这些蛋白质功能主要集中在细胞部分、细胞过程和结合活性等方面。以Pathway数据库作为参考,依据代谢途径可将蛋白质定位到201 个代谢途径分支,涉及PI3K-Akt信号通路、磷脂酶D信号通路等。与Cluster of Orthologous Groups of proteins(COG)数据库进行比对表明,这些蛋白质主要参与碳水化合物的运输和新陈代谢、信号转导机制等生命活动。研究结果不仅有助于了解母乳低丰度蛋白的功能,而且可为婴幼儿的健康成长和疾病预防提供理论依据,为母乳喂养的保护作用机制及有关乳腺疾病研究提供技术支撑。

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