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—— 中国食品杂志社
利用黑曲霉自身强启动子（葡萄糖淀粉酶启动子，PglaA）实现了酸性果胶裂解酶PelD在黑曲霉中的过量表达，重组酸性果胶裂解酶经镍柱亲和层析纯化后进行Western blot鉴定及酶学性质研究。重组酸性果胶裂解酶在摇瓶发酵条件下最高酶活力达到8 822.6 U/mL；经一步纯化后，该重组酶的比活力为8 522.7 U/mg，回收率为79.4%；该重组酶的最适反应pH值为5.0，在pH 3.0～6.5范围内40 ℃保温2 h仍能保持50%以上的相对酶活力，在酸性pH值下稳定性良好；最适反应温度为50 ℃，该重组酶在30～50 ℃的范围内非常稳定；在1 mmol/L浓度下，Ca2＋、Mg2＋、Cu2＋、Zn2＋、Ni2＋、Mn2＋、Ba2＋对该重组酶具有激活作用，其中Zn2＋、Ni2＋、Ba2＋激活作用较为显著，而十二烷基硫酸钠表现为抑制作用；底物特异性分析表明该酶能够特异性地降解高度甲酯化果胶，其对柑橘果胶（酯化度≥85%）酶活力高达31 248.0 U/mL；此外，重组酶对橙汁、苹果汁和葡萄汁具有良好的澄清效果，其中橙汁的透光度提高了16.9 倍，苹果汁的透光度提高了10.5 倍，葡萄汁的透光度提高了4.7 倍。
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