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—— 中国食品杂志社
为实现大肠杆菌高效生产β-烟酰胺单核苷酸（β-nicotinamide mononucleotide，β-NMN），设计模块化代谢改造策略。首先，对烟酰胺（nicotinamide，NAM）和β-NMN支路代谢涉及的8 个酶进行失活，减少底盘细胞对前体和产物的额外消耗。其次，通过引入NAM输入蛋白（BcNiaP）、β-NMN输出蛋白（BmPnuC）、5-磷酸核糖-1-焦磷酸合成酶（5-phosphoribosyl-1-pyrophosphate synthetase，Prs）和烟酰胺磷酸核糖转移酶（nicotinamide phosphoribosyl transferase，Nampt），敲除调节蛋白PurR，工程菌N12’摇瓶发酵可积累0.34 g/L的β-NMN；此后，比对筛选发现Comamonadaceae bacterium来源的Nampt活性较高且对底盘细胞负担较小；通过进一步强化BmPnuC和Prs的表达水平，工程菌N18摇瓶发酵β-NMN产量提高至1.36 g/L。最后，利用发酵罐分批补料发酵38 h，β-NMN产量达到10.2 g/L，NAM到β-NMN的摩尔转化率为74.5%。研究构建的β-NMN发酵菌株具有遗传背景清晰、无营养缺陷、无需诱导等优势，工业前景良好。
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