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—— 中国食品杂志社
目的：基于多酶恒温快速扩增（multienzyme isothermal rapid amplification，MIRA）与封闭式侧向流层析（lateral flow dipstick，LFD）联用技术，建立肉制品真实性快速检测方法，解决实验室方法不适于基层与现场快检需求的问题。方法：通过Genbank筛选猪、牛、羊、鸡、鸭线粒体基因的特异序列，使用DNAStar Megalign软件比对种内保守、种间特异的靶片段，依据MIRA引物探针设计原则设计靶基因引物探针组，通过阳性对照、阴性对照、空白对照等方式系统筛选引物探针，确定猪、牛、羊、鸡、鸭的专属性引物探针，并采用反应体系、反应温度、反应时间筛选，优化完善特异性检测方法。对方法进行系统的方法学考察，包括DNA提取、灵敏度、检出限、假阳性与假阴性考察等，验证方法的有效性。结果：使用建立的方法与实时荧光聚合酶链式反应检测进行比对分析，方法的平均假阳性率为3.49%、假阴性率为3.54%，符合现场快检方法的要求。结论：本研究建立了牛、羊、猪、鸡、鸭5 种常见肉类的MIRA-LFD技术，并证实了其有效性和可行性，实现了肉制品真实性的现场快检。
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