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香辛料SYBR GREEN I染料实时聚合酶链式反应检测方法的建立及应用
来源:导入 阅读量: 85 发表时间: 2024-08-04
作者: 杨晴丽,王仁静,张茹,孟宪卓,姚帮本,陈赵然,张旭,方建军,陈伟
关键词: 香辛料;SYBR GREEN I染料;实时聚合酶链式反应;检测
摘要:

目的:本研究致力于建立香辛料真实性成分的分子鉴定方法,为香辛料的掺假提供有效的鉴定和检测方法,在不同的使用条件下分别实现定性或半定量分析,为建立相关标准提供一定的基础技术支撑。方法:研究采用SYBR GREEN I染料实时聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法,通过设计特异性引物成功建立了特异性检测八角、茴香、胡椒和花椒的分析技术。结果:该方法能够特异性检测出八角、茴香、胡椒、花椒,Ct值在标准品体积分数0.001%~10%范围内线性关系良好。针对八角标准品,检测限为1%;针对茴香、花椒、胡椒标准品,最检测限均为0.001%。利用该方法对5 份实际样本进行检测,分别在样本1中未检测出八角、茴香、胡椒、花椒;样本2、3、5中检测出八角、茴香、胡椒;样本4中检测出八角、茴香、胡椒、花椒。结论:本实验建立的SYBR GREEN I染料实时PCR方法灵敏度高、重复性好,可应用于实际样品的检测。

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