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基于RAA-CRISPR/Cas12a技术的桃成分单管一体化快速检测方法
来源:导入 阅读量: 43 发表时间: 2024-11-08
作者: 王琳, 邢冉冉, 于耀鲜, 易秋菊, 卢思远, 邓婷婷, 王旭, 陈颖
关键词: 重组酶介导的等温扩增;CRISPR/Cas12a;单管一体化;桃成分;快速检测
摘要:

通过设计特异性的桃重组酶介导的等温扩增(recombinase-aided amplification,RAA)和CRISPR RNA(crRNA)引物,建立RAA技术结合CRISPR/Cas12a系统的单管一体化桃成分快速检测方法,并分析该方法的特异性、灵敏度和检出限,同时对市售样品进行检测。结果显示,该方法不依赖大型仪器设备,在30 min内即可完成桃成分的快速检测;与其他常见水果物种之间无交叉污染,表现出良好的特异性;该方法的灵敏度为1.0×10-1 ng/µL;检出限为1%;通过对20 份市售样品检测,结果显示本方法与实时聚合酶链式反应法检测结果一致。因此,本研究建立的RAA-CRISPR/Cas12a单管一体化桃成分快速检测方法具有特异性好、灵敏度高的优点,为桃成分快速检测提供了一种新的技术。

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