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—— 中国食品杂志社
为了提高来源于酿酒酵母的烟酰胺核糖激酶1（nicotinamide riboside kinase 1 from Saccharomyces cerevisiae，ScNRK1）的热稳定性，本研究基于计算机辅助技术虚拟筛选出ScNRK1的6 个单点突变体，通过定点突变技术完成6 个单点突变的表达及酶学特性分析，然后挑选出3 个优势突变体进行第2轮的组合突变。结果显示，经过两轮突变，获得了1 个热稳定性和催化活性均显著提高的突变体T136P/S209A，其最适反应温度提高至45 ℃，45 ℃条件下的半衰期为48.98 min，是野生型ScNRK1的4.2 倍；其比活力为146.63 IU/mg，是野生型的1.98 倍。本研究基于理性设计的手段，成功获得了热稳定性和催化活性显著增强的ScNRK1突变体，有望为通过理性设计提高酶分子的热稳定性提供新思路，为烟酰胺单核苷酸的高效、低成本生产提供新酶源。
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