为研究传统真菌发酵核桃蛋白产物中具有维持血糖健康水平的肽段,在发酵产物动物喂养总体评价的基础上,采用Sephadex G-50凝胶色谱和高效液相色谱分级分离纯化,以α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶和二肽基态酶-IV活性为评价指标,采用液相色谱-串联质谱进行分析,借助生物信息学工具对得到的分离组分IV、V、VI组共有的和差异的肽段,及其来源的蛋白,获得主要活性肽段,利用液相色谱测定含量,通过检索UniProt在线平台获得相关肽的来源,并用分子对接工具分析活性肽与3 种酶的相互作用。结果表明,通过2型糖尿病小鼠造模,可以得到粗肽可以有效控制患病小鼠的体质重、摄食量和血糖,缓解胰岛素抵抗和提高葡萄糖耐量。在Sephadex G-50凝胶分离纯化后得到的分子质量较小的组分IV、V、VI中,组分V对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制活性与组分IV和VI没有显著差异,但是对二肽基态酶-IV抑制活性显著其他两组。随后对组分IV、V、VI进行多肽分析比较,并且对其相同肽段进行含量测定,发现在第V中,与VI相同的肽段MMRPDEDEQEGQRQ和LPLLR占总肽含量的82.3%,对DPP-IV抑制活性94.3%源于这两条肽的作用。因此,在众多相同肽段中这两条肽链极具血糖调节活性肽开发前景。
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