
为了评价西南手参醇提物(alcohol extract from Gymnadenia orchidis,GoAE)的抗衰老活性及其机制,以四川省九龙县产西南手参块茎为材料,研究了不同质量浓度GoAE(0、0.5、1.0、2.0 mg/mL)及其活性成分天麻素(gastrodin,Gas)对N2秀丽隐杆线虫寿命、咽泵频率、摆动能力、体长、体宽和生殖力的影响。以20 μmol/L鱼藤酮(rotenone,RO)构建线粒体氧化损伤线虫模型,应用生理生化技术、荧光显微技术、透射电镜技术和聚合酶链式反应技术研究2.0 mg/mL GoAE干预下氧化损伤线虫抗氧化系统和线粒体数量、形态、膜电位、膜蛋白及其基因表达的变化规律。结果表明:在GoAE和Gas作用下,线虫寿命显著延长,咽泵频率、摆动能力、体长和体宽明显增加(Gas处理组体宽变化不显著),但线虫产卵量变化不大,GoAE的这些效应显著优于Gas;在GoAE干预下,RO诱导产生的过量活性氧和丙二醛含量显著下降,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶活性显著升高,SOD-3蛋白和热休克蛋白16.2蛋白表达量以及daf-16、sod-1、sod-3、ctl-1和hsp-16.2基因的表达量显著上调。同时,RO诱导的线粒体功能障碍明显改善,线虫体内的线粒体数量增加,线粒体空泡现象减少,膜电位升高,线粒体膜相关基因gas-1、clk-1、isp-1和atp-2表达量以及内、外膜蛋白表达量均升高。线粒体融合基因eat-3、fzo-1和自噬基因unc-51、atg-7、bec-1、Igg-2和vps-34的表达量上调,分裂基因drp-1的表达量下调。上述结果说明,GoAE可通过激活DAF-16/SOD-3抗氧化通路、修复线粒体功能障碍,从而延缓线虫衰老。
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