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—— 中国食品杂志社
为获得噬菌体qdsa001的内溶素，本实验首先利用多种在线软件对内溶素lys56（GenBank：ARQ95812.1）的理化性质、信号肽、跨膜域和结构域等特性进行分析，然后选择克隆表达法制备目的蛋白。将合成的目的基因插入原核表达载体pET-30a中，构建重组质粒pET-30a-lys56，转化至大肠杆菌Rosetta（DE3）中，获得表达稳定的基因工程菌，经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside，IPTG）诱导表达，利用镍琼脂糖亲和层析纯化表达产物。经在线软件预测结果显示，该蛋白分子质量为35.1 kDa，无信号肽和跨膜域，仅含有一个Ami_2结构域。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析显示重组蛋白表达成功，且以可溶性蛋白的形式存在于细胞破碎上清液，分子质量约35?kDa，与预期蛋白大小一致。重组蛋白最佳表达条件为：IPTG浓度0.5?mmol/L，20?℃过夜诱导。
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