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—— 中国食品杂志社
采用降落聚合酶链式反应（touchdown polymerase chain reaction，TD-PCR）技术，从2-酮基葡萄糖酸工业生产菌株变形假单胞菌JUIM01中克隆了编码2-酮基葡萄糖酸差向异构酶的基因kguE。将目的基因与质粒pET-28a（＋）重组后转入宿主表达菌中，获得了重组菌株大肠杆菌BL21（DE3）/pET-28a（＋）-kguE。在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷的诱导下，该重组菌株表达了一个分子质量约为30.5 ku的融合蛋白，且该蛋白的Western-blot鉴定结果显示为阳性。生物信息学分析结果表明，该蛋白是一种由256 个氨基酸残基组成的分子质量为28.5 ku的亲水性蛋白，与恶臭假单胞菌的2-酮基葡萄糖酸差向异构酶在氨基酸序列上的一致性达78%，定位于细胞质中，其二级结构中α-螺旋、延伸链和无规则卷曲所占的比例分别为40.62%、17.19%和42.19%。本研究结果为变形假单胞菌2-酮基葡萄糖酸差向异构酶的功能研究提供了一定理论支持。
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