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苯基乳酸耐受性大肠杆菌的筛选及其高产苯基乳酸特性
来源:食品科学网 阅读量: 112 发表时间: 2017-07-24
作者: 徐 艳,郭 倩,朱益波,王立梅,齐 斌
关键词: 紫外诱变;苯基乳酸;苯基乳酸耐受菌株;大肠杆菌;全细胞转化
摘要:

苯基乳酸(phenyllactic acid,PLA)耐受性菌株的筛选能够有效降低PLA对生产菌株的抑制作用,有利于PLA产量的提高。通过紫外诱变的方法筛选耐受PLA的菌株,并应用于PLA的合成。以Escherichia coli BL21(DE3)作为原始出发菌株,通过紫外诱变的方法诱变筛选获得一株耐受PLA突变菌株E. coli Z2016(CCTCC保藏编号M2016332)。以E. coli Z2016为宿主菌,分别构建了重组菌株E. coli Z2016 pET-28a-ldhY52V和E. coli Z2016 pET-28a-ldhL用于D-和L-苯基乳酸的合成。结果表明:E. coli Z2016在含有1 g/L D-PLA的培养基中能够正常生长;重组突变菌株E. coli Z2016 pET-28a-ldhY52V和E. coli Z2016 pET-28a-ldhL全细胞合成D-PLA和L-PLA产量分别为6.75、6.97 g/(L·h),较重组出发菌株分别提高了14.02%和8.95%;分批补加底物反应120 min,E. coli Z2016 pET-28a-ldhY52V得到的D-PLA为20.02 g/L,较对照组提高22.17%,转化率为90.07%;E. coli Z2016 pET-28a-ldhL得到的L-PLA产量为20.87 g/L,较对照组提高16.85%,最终转化率为91.24%。筛选耐受性菌株是提高PLA产量的有效途径。

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