目的:探究单核细胞增生李斯特菌sigB基因对次氯酸钠(NaClO)胁迫的调控作用。方法:在半致死浓度 NaClO(3 mmol/L)胁迫下,比较该菌野生株WaX12与sigB基因敲除突变株的耐受程度及菌内的活性氧水平,并通 过实时定量聚合酶链式反应技术(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)进一步观察lmo1433、 lmo0906、lmo2344、ohrR、lmo2770基因随胁迫时间的转录水平变化。结果:野生株和sigB突变株的表型测定结果 显示,野生株比缺失株更耐NaClO胁迫,而且此现象在稳定期更加明显;当胁迫时间达到30 min时,突变株内的活 性氧水平增长率比野生株高出19.97%,进一步说明sigB基因对NaClO胁迫有一定的调控作用。RT-PCR结果表明, 基因lmo1433、lmo2344和ohrR在野生株的表达水平显著高于突变株(P<0.01),而基因lmo0906、lmo2770的表达 水平在野生株和缺失株中的差异并不明显。结论:研究表明,单核细胞增生李斯特菌sigB基因对NaClO胁迫有一定 的影响作用,且部分作用可能由激活部分调节机体氧化还原平衡的基因得以实现。
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