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—— 中国食品杂志社
目的：以乳粉中污染的阪崎肠杆菌（Enterobacter sakazakii）为检测目标，开发一种能快速检测其污染的试剂盒。方法：以两株阪崎肠杆菌单克隆抗体分别为包被抗体和检测抗体，建立双抗体夹心酶联免疫吸附实验方法，优化各个反应条件，制成在2 h内能发生显色反应的检测试剂盒。结果：包被抗体的最佳工作质量浓度为10 μg/mL，检测抗体的最佳稀释倍数为1∶5 000。试剂盒的检测限为104 CFU/mL，在104～108 CFU/mL范围内OD450 nm值与阪崎肠杆菌浓度的常用对数值呈线性关系。特异性实验中，试剂盒可检出3 株阪崎肠杆菌标准菌株，对其他9 株食品中常见致病菌的检测均呈阴性。模拟带菌实验中，初始菌浓度为1 CFU/mL的模拟样品经过8 h前增菌后，通过该试剂盒便可检出。该试剂盒的批内、批间变异系数均小于6%，至少可在室温保存6 个月。结论：该双抗体夹心试剂盒具有灵敏度高、特异性好、精密度高、稳定性强等优点，可应用于乳粉中阪崎肠杆菌的快速检测。
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