目的:建立更加灵敏、特异的食品镉离子胶体金免疫层析快速检测方法。方法:用1-(4-异硫氰苄基)乙烯基二胺-N,N,N’,N’-四乙酸(1-(4-isothiocyanobenzyl)ethylenediamine-N,N,N’,N’-tetraacetic acid,iEDTA)鳌合镉离子合成Cd2+-iEDTA半抗原,异硫氰酯法制备免疫原Cd2+-iEDTA-牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)和包被原Cd2+-iEDTA-鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA),电感耦合等离子体发射光谱法和聚丙烯酰胺凝胶法进行鉴定;用Cd2+-iEDTA-BSA免疫Balb/C小鼠,细胞融合技术筛选Cd2+-EDTA单克隆抗体(mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备Cd2+-EDTA mAb;应用Cd2+-EDTA mAb建立Cd2+残留胶体金免疫层析快速检测方法(Cd2+-Strip),并测定其性能。结果:免疫原偶联成功,Cd2+-iEDTA-BSA中BSA与Cd2+的含量分别为7.1 mg/mL和191.7 μg/mL;筛选出1A3C11、2B7D8、2E10G9、4F3E7共4 株杂交瘤细胞,经9 次传代分泌抗体稳定,亲和力最高的2E10G9株亲和常数(Ka)为7.58×108 L/mol,对Cd2+-iEDTA的半数抑制浓度为16.3 μg/L,与Hg2+-EDTA的交叉反应(cross-reaction,CR)率为18.6%,与其他重金属离子无CR;Cd2+-Strip的检测时间为10 min,检出限为5 μg/L,其检测结果与竞争ELISA试剂盒(Cd2+ ELISA-Kit)、电感耦合等离子体发射光谱法符合率为100%。结论:制备出了亲和力高、特异性强的Cd2+ mAb,建立了灵敏、特异、快速、简便的食品镉离子胶体金免疫层析快速检测方法。
2023年第44卷 2022年第43卷 2021年第42卷 2020年第41卷 2019年第40卷 2018年第39卷 2017年第38卷 2016年第37卷 2015年第36卷 2014年第35卷 2013年第34卷 2012年第33卷 2011年第32卷 2010年第31卷 2009年第30卷 2008年第29卷 2007年第28卷 2006年第27卷 2005年第26卷 2004年第25卷 2003年第24卷 2002年第23卷 2001年第22卷 2000年第21卷 1999年第20卷 1998年第19卷 1997年第18卷 1996年第17卷 1995年第16卷 1994年第15卷 1993年第14卷 1992年第13卷 1991年第12卷 1990年第11卷 1989年第10卷 1988年第09卷 1987年第08卷 1986年第07卷 1985年第06卷 1984年第05卷 1983年第04卷 1982年第03卷 1981年第02卷 1980年第01卷
电话: 010-87293157
地址: 北京市丰台区洋桥70号
版权所有 @ 2023 中国食品杂志社 京公网安备11010602060050号 京ICP备14033398号-2