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枯草芽孢杆菌木聚糖酶的克隆表达及其酶解两种木聚糖的产物分析
来源:食品科学网 阅读量: 96 发表时间: 2017-06-07
作者: 韦露莎,吴一飞,陈 辉
关键词: 木聚糖内切酶;低聚木糖;基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱
摘要:

通过基因克隆方法获得枯草芽孢杆菌木聚糖酶XynA,考察经镍离子亲和柱纯化后的XynA分别在桦木木聚糖和毛榉木木聚糖中的酶解情况,利用薄层色谱法(thin layer chromatography,TLC)及基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF/MS)法鉴定木聚糖酶XynA的酶解产物。运用MALDI-TOF/MS分析枯草芽孢杆菌木聚糖酶XynA酶解桦木木聚糖和毛榉木木聚糖产物不同的聚合度寡糖的分布情况。结果表明:在桦木木聚糖酶解液中,产生的中性木寡糖主要为木二糖(X2)和木三糖(X3),酸性木寡糖聚合度为4~12,并且每一个酸性木寡糖上仅连接着一个甲基葡萄糖醛酸侧链(MeG)。在毛榉木木聚糖酶解液中,产生的中性木寡糖与在桦木木聚糖酶解液中相同,酸性木寡糖的结构相似,聚合度为4~16。因此木聚糖酶XynA具有生产木二糖(X2)和木三糖(X3)以及酸性木寡糖(MeGXn)的功能。

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