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抗瓜类细菌性果斑病菌单克隆抗体的制备及特性鉴定
来源:食品科学网 阅读量: 106 发表时间: 2017-06-07
作者: 曾海娟,王广彬,郭慧琴,邱 实,李建武,翟绪昭,丁承超,宋春美,刘 箐
关键词: 细菌性果斑病菌;单克隆抗体;制备;特性鉴定
摘要:

以瓜类细菌性果斑病菌燕麦嗜酸菌西瓜亚种(Acidovorax avenae subsp. citrulli,Aac)野生型菌株SD01免疫BALB/c小鼠,间接酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法筛选获得4 株稳定分泌抗SD01菌株的单克隆杂交瘤细胞株6F、6D、7E、4F,腹水抗体效价分别为1∶102 400、1∶102 400、1∶25 600、1∶51 200。采用饱和硫酸铵沉淀及Protein-G亲和层析法纯化腹水,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodiumdodecyl sulfate-polyacrylamide gelelectrophoresis,SDS-PAGE)显示纯化后的单克隆抗体(mAb)纯度较高,纯化后单克隆抗体(2 mg/mL)效价分别为1∶12 800、1∶6 400、1∶3 200、1∶6 400,亚型鉴定结果表明4 种单克隆抗体均为IgG2 a。间接ELISA结果表明,4 种单克隆抗体对8 种果斑病菌结合能力不同:6F可以结合6 种,6D、4F可以结合8 种,7E可以结合5 种。与3 种非Aac近源种植物病原菌交叉反应情况为:6F、4F与2 种非Aac近源种植物病原菌存在交叉反应,6D、7E与3 种非Aac近源种植物病原菌均无交叉反应。

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