目的:研制基于蛋白质杂化纳米技术和酶促反应的淀粉酶纳米花型时间-温度指示剂(time-temperature indicator,TTI),确定其活化能及适合指示的食品种类。方法:利用淀粉酶与铜离子之间相互作用,对淀粉酶进行固定化,形成淀粉酶@Cu纳米花,改变淀粉酶用量,筛选出花形最好的纳米花,并测试纳米花中淀粉酶的生物活性及保存稳定性;以15 mL 40 g/L可溶性淀粉溶液为底物,4.5 mL 1 g/L碘液为指示剂,分别加入10、20、30、40、50、60 mg的淀粉酶@Cu纳米花,制备出6 种配方的TTI;在5、15、25、35 ℃的恒温条件下,研究6 种TTI的性能,观察变色过程,测定动力学参数,计算反应活化能值。结果:淀粉酶质量浓度为0.5 mg/mL时,淀粉酶@Cu纳米花的花形最完整,淀粉酶活性提高到3.42 倍,保存稳定性显著提高;6 种TTI呈现出从深蓝色到无色的变化过程,活化能分别为14.84、21.00、28.85、33.03、32.55 kJ/mol和32.83 kJ/mol。结论:淀粉酶纳米花型TTI操作简单,指示效果明显,根据TTI与食品匹配原则,该系列TTI适用于监测由扩散控制、酶反应、脂肪氧化等原因引起腐败变质的食品质量变化。
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