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应用LNA-TaqMan探针实时荧光PCR检测大米制品中转基因成分
来源:食品科学网 阅读量: 142 发表时间: 2017-06-07
作者: 潘 广,章桂明,陈枝楠,程颖慧,向才玉,包先雨,凌杏园
关键词: 大米制品;锁核酸;锁核酸探针;实时荧光PCR
摘要:

大米制品中痕量转基因成分的检测需要特异和超灵敏的检测方法。本研究以行业标准中转基因大米筛查位点CaMV35S启动子、NOS终止子和Cry1A基因为目标,利用在常规TaqMan探针中掺入锁核苷酸提高探针退火温度和杂交特异性等特点,经比较以上位点不同LNA-TaqMan探针实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测效果,建立了针对上述筛查位点的基于LNA-TaqMan探针的新型实时荧光PCR检测方法。该方法特异性强,检测灵敏度超高;与普通TaqMan实时荧光PCR方法相比,其反应Ct值可提前1~3 个循环(Cry1A位点除外),检测低限可达3 pg。该检测方法可以用以检测大米制品中常规实时荧光PCR难以检测到的痕量转基因大米成分。

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