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基于蛋白A-琼脂糖凝胶黄曲霉毒素B1免疫亲和柱的制备
来源:食品科学网 阅读量: 203 发表时间: 2017-06-07
作者: 龚 燕,杨婷婷,莫晓嵩,张海涛,黄 伟,陆廷瑾,张东升,汪海峰
关键词: 黄曲霉毒素B1;蛋白A-琼脂糖凝胶;定向偶联;免疫亲和柱
摘要:

将初步纯化的抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体,定向偶联于蛋白A-琼脂糖凝胶,制备成免疫亲和层析柱。结果显示,辛酸-饱和硫酸铵纯化后的单抗质量浓度为17.5 mg/mL,纯度为45.1%,抗体亚型为IgG1。取纯化后抗体48 μL与1 mL蛋白A凝胶偶联,偶联率达98.1%,高效液相色谱测定其平均相对柱容量为105 ng/0.125 mL凝胶、柱空白为0,不同样品(玉米粉、面粉、花生油、酱油、醋等)平均加标回收率在80%以上。该亲和柱在2~8 ℃保存12 个月后,相对柱容量仍可达72 ng/0.125 mL凝胶。该法制备的亲和柱相对柱容量大,稳定性好,可用于样品中黄曲霉毒素B1分离净化的要求。

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