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—— 中国食品杂志社
目的：从苦荞麦种子中提取、纯化苦荞凝集素，对其凝血及酶学活性等性质进行初步研究。方法： 采用缓冲液抽提、硫酸铵沉淀、透析及DEAE-纤维素阴离子交换层析（DEAE fast flow，DEAE FF）纯化凝集素；高碘酸希夫（periodic acid-Schiff，PAS）染色鉴定其蛋白种类，硫酸-苯酚法测定糖含量；凝血实验和糖抑制实验检测其凝血活性和结合糖特异性；以对硝基苯磷酸二钠为底物，测定磷酸酯酶活性。结果：从苦荞麦种子中获得了一种具有凝血功能的蛋白质--苦荞凝集素（tartary buckwheat lectin，TBL）。纯化的TBL在十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）图谱上显示单一条带，根据SDS-PAGE计算其分子质量约为62 kD。PAS染色证明TBL为糖蛋白，糖含量为5.8%。凝血实验表明TBL对人的O型血红细胞具有特异性凝集作用，效价为15 μg/mL，对其他血型的红细胞没有凝血效应。血凝活性被D-甘露糖和D-葡萄糖抑制，推测其是一种甘露糖结合凝集素。酶学性质鉴定显示，TBL具有磷酸酯酶活性，米氏常数Km= 9.86×10－3 mol/L。结论：TBL可能是苦荞麦种子中的一种具有多种酶学功能的甘露糖凝集素
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