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β-1,3-1,4-葡聚糖酶高产菌诱变选育及基因克隆表达
来源:食品科学网 阅读量: 104 发表时间: 2017-06-07
作者: 陈 计,高 鹏,陆兆新,吕凤霞,张 充,赵海珍,别小妹
关键词: 高地芽孢杆菌;β-1,3-1,4-葡聚糖酶;亚硝基胍诱变;低能N+束注入;异源表达
摘要:

为获得β-1,3-1,4-葡聚糖酶高产菌株,以高地芽孢杆菌YC-9为出发菌株,通过亚硝基胍(nitrosoguanidine,NTG)和低能N+束诱变育种,筛选和选育得到两株突变株N-2-2和10-30s-3,发酵培养60 h,酶活力分别达到28.6 U/mL和36.1 U/mL,分别是出发菌株的2.36 倍和2.98 倍,与YC-9菌株相比,突变菌株菌体生长下降但发酵产酶量增加。进一步将β-1,3-1,4-葡聚糖酶克隆并在大肠杆菌中成功表达,经过30 ℃诱导6 h后,胞内酶活力达79.2 U/mL,为出发菌株的6.5 倍。

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